Устранение распространенных проблем при резке срезов на ротационном микротоме

Роторный микротом превращает парафиновый блок в тонкие однородные срезы, которые затем микроскоп действительно может раскрыть. Когда резка идет неправильно, неисправность редко возникает только в инструменте: обычно это цепочка фиксации, обработки, заделки, ухода за лезвием и настройки машины. В этом руководстве рассматриваются наиболее распространенные проблемы с ротационным микротомом, причины их возникновения и способы их устранения, позволяющие вернуть чистые ленты на водяную баню. Он написан для гистологических, патологоанатомических и учебных лабораторий, которым нужны воспроизводимые результаты без догадок.

Качество секции определяется до первого разреза.

Большинство дефектов срезов запекаются во время подготовки тканей. Если блок недостаточно обработан, чрезмерно обработан или плохо ориентирован, никакая регулировка лезвия не исправит его на микротоме. Рассматривайте приведенные ниже шаги как первую линию устранения неполадок.

Хорошая привычка — проверять блок, нож и ванну, прежде чем прикасаться к подающему колесу. Лаборатории, которые стандартизируют эту предполетную процедуру, сообщают о гораздо меньшем количестве испорченных блоков, а время, потраченное на проверку, окупается на каждом участке, который не нужно перерезать.

• Фиксация: ткань должна быть зафиксирована достаточно долго и в правильном реагенте, иначе она останется мягкой и порвется.
• Обработка: сортированные спирты и очистка должны полностью обезвоживаться и инфильтрироваться, иначе срезы сжимаются и крошятся.
• Встраивание: парафин должен быть без пузырьков и полностью окружать ткани, при этом лицо должно быть ориентировано на нужный разрез.
• Обрезка блоков: обнажьте чистое квадратное лицо и удалите остатки парафина, чтобы первые срезы не были загрязнены.

Проблема 1: разделы рвутся, царапаются или перетаскиваются.

Порванные или потертые участки являются классическим признаком встречи тусклого или грязного края с прочной тканью. Лезвие выполняет работу, которую оно не может выполнить чисто, и в результате на участке возникают продольные царапины или разрывы волокон.

• Тупой или сломанный нож: перейдите к новому сегменту лезвия или замените лезвие; даже крошечный порез забивает каждый раздел.
• Неправильный угол зазора: Немного увеличьте угол зазора, чтобы кромка разрезала, а не царапала поверхность блока.
• Твердая или недостаточно обработанная ткань: повторно обработать или повторно внедрить; Перед резкой участки, похожие на кальций или кости, нуждаются в декальцинации.
• Обломки на краю: протираем нож и блокируем лицо; оставленная на краю восковая стружка тянет и рвет ленту.

Проблема 2: секции сморщиваются, сгибаются или сжимаются.

Морщинистые и сложенные участки обычно означают, что лента не расслабляется при выходе из лезвия. Парафин слишком теплый, водяная баня слишком горячая или срез толще, чем блок может аккуратно отделить. Сжатие также проявляется, когда угол ножа слишком крутой.

• Водяная баня слишком горячая: опустите его до температуры чуть выше температуры плавления парафина (часто от 40 до 45 ° C), чтобы срезы стали плоскими, не плавясь.
• Срез слишком толстый для ткани: уменьшайте толщину на шаг; очень мягкие блоки сжимаются при больших настройках.
• Угол обзора слишком мал: немного откройте угол, чтобы секция поднималась, а не катилась.
• Блок слишком теплый: дайте блоку остыть или разрежьте в более прохладном помещении; теплый парафин сворачивается в момент его высвобождения.

Проблема 3: толщина варьируется в зависимости от разреза.

Если размер одной секции составляет 4 микрометра, а следующей — 6, инструмент или блок перемещается между ходами. Переменная толщина портит морфометрию и окрашивает неравномерно, поэтому ее нужно фиксировать в источнике, а не игнорировать.

• Ослабленный зажим образца: затяните патрон и проверьте, чтобы блок сидел ровно; любая игра меняет эффективную подачу.
• Изношен механизм подачи: проверьте калиброванную подачу и отправьте ее в сервисное обслуживание, если заявленная настройка отклоняется от реза.
• Непостоянное усилие на маховике: плавно и полностью поворачивайте колесо; частичные или отрывистые удары пропускают продвижение вперед.
• Вибрация или нестабильная скамейка: поместите микротом на твердую поверхность и изолируйте его от соседних шейкеров или центрифуг.

Проблема 4: следы дребезжания и неровная лента

Дребезжание выглядит как тонкие горизонтальные полосы по сечению. Это проблема резонанса или стабильности: блок, лезвие или весь инструмент вибрирует при прохождении лезвия. Поскольку он механический, исправление почти всегда связано с стабильностью и резкостью, а не с толщиной.

• Блок не поддерживается жестко: рассверливают или повторно зажимают, чтобы ткань не имела свободной поверхности, которая может сгибаться во время разреза.
• Незакрепленный держатель ножа: затяните держатель лезвия и опорную пластину; сдвигающий край сколов и болтовни.
• Тупой край: перейти в новый сегмент; тупой край вибрирует сквозь твердые ткани.
• Резка слишком быстро: замедлите ход и сохраняйте равномерное давление; спешка возбуждает болтовню.

Проблема 5: нет секций или секции прилипают к лезвию.

Иногда колесо проворачивается, и с колодки ничего не отрывается, или секции прилипают к ножу, а не образуют ленту. Обычно это проблема настройки или среды, а не неисправная машина, и ее можно быстро решить, если вы знаете обычных подозреваемых.

• Подача не включена: убедитесь, что регулятор толщины установлен и продвижение отпущено; нулевая или заблокированная подача режет воздух.
• Неправильно установлена ​​пластина стабилизатора поперечной устойчивости: отрегулируйте или уберите его; пластина, стоящая на краю, блокирует подъем секции.
• Статические или сухие условия: слегка увеличьте влажность или используйте антистатическую ступеньку, чтобы секции отделились от лезвия.
• Лезвие слишком высоко или низко: переустановите нож так, чтобы режущая кромка соприкасалась с поверхностью блока на правильной высоте.

Контрольный список перед секционированием, который вы можете повторить

Короткая, повторяемая предполетная подготовка предотвращает большинство вышеперечисленных проблем. Запускайте его одинаково для каждого сеанса, чтобы устранение неполадок превратилось в профилактику.

• Осмотреть: перед первым разрезом проверьте поверхность блока, сегмент лезвия и зажимы.
• Набор: подтвердите толщину, угол зазора и температуру водяной бани.
• Тест: вырежьте один фрагмент и просмотрите его под микроскоп перед запуском пакета.
• Записывать: запишите настройки для каждого блока, чтобы обеспечить воспроизводимость хорошего результата.
• Чистый: протирайте лезвие и ванну и храните лезвия в безопасном месте. шкаф биобезопасности область.

Инструмент, который подходит для повседневной жизни

Надежный микротом избавляет от догадок на самом разрезе, позволяя вам сосредоточиться на подготовке и интерпретации. Для команд, сравнивающих оборудование, можно использовать микротом с калиброванным аналитические весы и устойчивый центрифуга стенд обеспечивает единообразие всего рабочего процесса гистологии.

⭐ Рекомендуемый ротационный микротом | Винком МСТ-202

Винком МСТ-202

Роторный микротом MCT-202 компании Wincom предназначен для гистологических, патологоанатомических и исследовательских лабораторий, которые готовят залитые парафином срезы тканей, с диапазоном настройки толщины среза от 1 до 25 микрометров, минимальной настройкой 1 микрометр, максимальным размером образца 40 на 30 миллиметров и погрешностью в пределах плюс-минус 5 процентов. Ручной поворотный маховик дает оператору точный и повторяемый контроль над каждым разрезом, а жесткая конструкция обеспечивает однородность секций по всему блоку. Это делает его подходящим для учебных лабораторий, диагностической гистологии и рутинных рабочих процессов в области патологии, которые требуют надежного секционирования с низкой дисперсией и без необходимости сложного обучения.

Посмотреть ротационный микротом Wincom MCT-202

Вспомогательное оборудование, которое защищает качество секции

Секционирование не происходит изолированно. Инструменты вокруг микротома решают, станет ли хороший срез хорошим слайдом, поэтому они заслуживают такого же внимания, как и сам аппарат.

• Просмотр: a микроскоп на скамейке, чтобы проверить каждую первую секцию перед пробежкой.
• Флаттинг: a водяная баня установите чуть выше расплавленного парафина, чтобы расслабить ленты.
• Монтаж: предметные стекла микроскопа и защитное стекло соответствует вашему режиму окрашивания.
• Обработка: а инкубатор или духовка и автоклав для встраивания и чистой лабораторной посуды многоразового использования.
• Обучение: наш блог и руководства, такие как роль микроскопов в диагностике и пять типов микроскопов, которые нужно знать.

Часто задаваемые вопросы